പരിശോധനയുടെ സംഗ്രഹവും വിശദീകരണവും
200 ദശലക്ഷത്തിലധികം ആളുകളെ ബാധിക്കുകയും പ്രതിവർഷം 1 ദശലക്ഷത്തിലധികം ആളുകളെ കൊല്ലുകയും ചെയ്യുന്ന കൊതുക് പരത്തുന്ന, ഹീമോലിറ്റിക്, പനി രോഗമാണ് മലേറിയ.P. Falciparum, P. vivax, P. ovale, P. മലേറിയ എന്നിങ്ങനെ നാല് ഇനം പ്ലാസ്മോഡിയം മൂലമാണ് ഇത് സംഭവിക്കുന്നത്.ഈ പ്ലാസ്മോഡിയകളെല്ലാം മനുഷ്യന്റെ എറിത്രോസൈറ്റുകളെ ബാധിക്കുകയും നശിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, വിറയൽ, പനി, വിളർച്ച, സ്പ്ലെനോമെഗാലി എന്നിവ ഉണ്ടാക്കുന്നു.P. ഫാൽസിപാരം മറ്റ് പ്ലാസ്മോഡിയൽ സ്പീഷീസുകളെ അപേക്ഷിച്ച് കൂടുതൽ ഗുരുതരമായ രോഗത്തിന് കാരണമാകുകയും മിക്ക മലേറിയ മരണങ്ങൾക്കും കാരണമാകുകയും ചെയ്യുന്നു.P. ഫാൽസിപാറം, P. vivax എന്നിവയാണ് ഏറ്റവും സാധാരണമായ രോഗകാരികൾ, എന്നിരുന്നാലും, സ്പീഷിസ് വിതരണത്തിൽ ഗണ്യമായ ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ വ്യത്യാസമുണ്ട്.
പരമ്പരാഗതമായി, ജീംസയിലെ ജീവികളുടെ പ്രദർശനത്തിലൂടെയാണ് മലേറിയ രോഗനിർണയം നടത്തുന്നത്, പെരിഫറൽ രക്തത്തിന്റെ കട്ടിയുള്ള സ്മിയറുകളാണ്, കൂടാതെ വിവിധ ഇനം പ്ലാസ്മോഡിയം രോഗബാധിതമായ എറിത്രോസൈറ്റുകളിൽ അവയുടെ രൂപം കൊണ്ട് വേർതിരിച്ചിരിക്കുന്നു1.ഈ സാങ്കേതികവിദ്യ കൃത്യവും വിശ്വസനീയവുമായ രോഗനിർണ്ണയത്തിന് പ്രാപ്തമാണ്, എന്നാൽ വിദഗ്ദ്ധരായ മൈക്രോസ്കോപ്പിസ്റ്റുകൾ നിർവചിക്കപ്പെട്ട പ്രോട്ടോക്കോളുകൾ ഉപയോഗിച്ച് നടത്തുമ്പോൾ മാത്രമാണ്, ഇത് ലോകത്തിലെ വിദൂരവും ദരിദ്രവുമായ പ്രദേശങ്ങൾക്ക് വലിയ തടസ്സങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു.
ഈ തടസ്സങ്ങൾ പരിഹരിക്കുന്നതിനായി വികസിപ്പിച്ചെടുത്തതാണ് മലേറിയ പിഎഫ് / പാൻ ആന്റിജൻ റാപ്പിഡ് ടെസ്റ്റ് കിറ്റ്.P. ഫാൽസിപാറം നിർദ്ദിഷ്ട പ്രോട്ടീനിലേക്കുള്ള ഒരു ജോടി മോണോക്ലോണൽ, പോളിക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ, ഹിസ്റ്റിഡിൻ റിപ്പീറ്റ് പ്രോട്ടീൻ II (pHRP-II), പ്ലാസ്മോഡിയം ലാക്റ്റേറ്റ് ഡിഹൈഡ്രജനേസ് (pLDH) എന്ന ഒരു ജോടി മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ എന്നിവ ഈ നാല് ഇനങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉത്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു. പ്ലാസ്മോഡിയം, അങ്ങനെ P. ഫാൽസിപാറം അല്ലെങ്കിൽ മറ്റ് മൂന്ന് പ്ലാസ്മോഡിയയിൽ ഏതെങ്കിലും ഒന്ന് ഉപയോഗിച്ച് അണുബാധയെ ഒരേസമയം കണ്ടെത്താനും വേർതിരിക്കാനും സാധ്യമാക്കുന്നു.ലബോറട്ടറി ഉപകരണങ്ങളില്ലാതെ, പരിശീലനം ലഭിക്കാത്ത അല്ലെങ്കിൽ കുറഞ്ഞ വൈദഗ്ധ്യമുള്ള ഉദ്യോഗസ്ഥർക്ക് ഇത് ചെയ്യാൻ കഴിയും.
തത്വം
പിഎഫ്/പാൻ മലേറിയ റാപ്പിഡ് ടെസ്റ്റ് കിറ്റ് ഒരു ലാറ്ററൽ ഫ്ലോ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് ഇമ്മ്യൂണോഅസെയാണ്.ടെസ്റ്റ് സ്ട്രിപ്പ് ഘടകങ്ങളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു: 1) കൊളോയിഡ് ഗോൾഡുമായി സംയോജിപ്പിച്ച മൗസ് ആന്റി-പിഎച്ച്ആർപി-II ആന്റിബോഡിയും (പിഎച്ച്ആർപി II-ഗോൾഡ് കൺജഗേറ്റുകൾ) മൗസ് ആന്റി-പിഎൽഡിഎച്ച് ആന്റിബോഡിയും അടങ്ങിയ ബർഗണ്ടി നിറമുള്ള കൺജഗേറ്റ് പാഡും (പിഎൽഡിഎച്ച്-ഗോൾഡ് കൺജഗേറ്റ്സ്),
2) രണ്ട് ടെസ്റ്റ് ബാൻഡുകളും (പാൻ, പിവി ബാൻഡുകളും) ഒരു കൺട്രോൾ ബാൻഡും (സി ബാൻഡ്) അടങ്ങുന്ന ഒരു നൈട്രോസെല്ലുലോസ് മെംബ്രൻ സ്ട്രിപ്പ്.മോണോക്ലോണൽ ആന്റി-പിഎൽഡിഎച്ച് ആന്റിബോഡി ഉപയോഗിച്ച് പാൻ ബാൻഡ് മുൻകൂട്ടി പൂശിയിരിക്കുന്നു, അതിലൂടെ പ്ലാസ്മോഡിയയുടെ നാല് സ്പീഷീസുകളിൽ ഏതെങ്കിലും അണുബാധ കണ്ടെത്താനാകും, Pf ബാൻഡ് Pf അണുബാധ കണ്ടെത്തുന്നതിന് പോളിക്ലോണൽ ആന്റി-പിഎച്ച്ആർപി-II ആന്റിബോഡികൾ കൊണ്ട് മുൻകൂട്ടി പൂശിയിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ C ബാൻഡ് ആട് ആന്റി മൗസ് IgG കൊണ്ട് പൂശിയിരിക്കുന്നു.
പരിശോധനയ്ക്കിടെ, ടെസ്റ്റ് കാസറ്റിന്റെ സാമ്പിൾ കിണറ്റിലേക്ക് (എസ്) രക്തസാമ്പിളിന്റെ മതിയായ അളവ് വിതരണം ചെയ്യുന്നു, ബഫർ കിണറിലേക്ക് (ബി) ഒരു ലിസിസ് ബഫർ ചേർക്കുന്നു.ബഫറിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളെ നശിപ്പിക്കുകയും വിവിധ പ്ലാസ്മോഡിയം ആന്റിജനുകൾ പുറത്തുവിടുകയും ചെയ്യുന്ന ഒരു ഡിറ്റർജന്റ് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇത് കാസറ്റിലെ സ്ട്രിപ്പിലുടനീളം കാപ്പിലറി പ്രവർത്തനത്തിലൂടെ മൈഗ്രേറ്റ് ചെയ്യുന്നു.pHRP-II സ്പെസിമെനിലെ അവതരണങ്ങൾ pHRP II-ഗോൾഡ് കൺജഗേറ്റുകളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കും.ഇമ്യൂണോകോംപ്ലക്സ്, പ്രീ-കോട്ടഡ് ആന്റി-പിഎച്ച്ആർപിഐഐ ആന്റിബോഡികൾ മെംബ്രണിൽ പിടിച്ചെടുക്കുന്നു, ഇത് ഒരു ബർഗണ്ടി നിറമുള്ള പിഎഫ് ബാൻഡ് ഉണ്ടാക്കുന്നു, ഇത് പിഎഫ് പോസിറ്റീവ് പരിശോധനാ ഫലത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.പിഎൽഡിഎച്ച് മാതൃകയിലുള്ള അവതരണങ്ങൾ പിഎൽഡിഎച്ച് ഗോൾഡ് കൺജഗേറ്റുകളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കും.ഇമ്മ്യൂണോകോംപ്ലക്സ്, പ്രീ-കോട്ടഡ് ആന്റി പിഎൽഡിഎച്ച് ആന്റിബോഡി ഉപയോഗിച്ച് മെംബ്രണിൽ പിടിച്ചെടുക്കുന്നു, ഇത് പ്ലാസ്മോഡിയം പോസിറ്റീവ് പരിശോധനാ ഫലത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.പാൻ ബാൻഡിന്റെ അഭാവത്തിൽ, മറ്റ് മൂന്ന് പ്ലാസ്മോഡിയകളിൽ ഏതെങ്കിലുമൊരു പോസിറ്റീവ് പരിശോധനാ ഫലം ശുപാർശ ചെയ്യാവുന്നതാണ്.
ഏതെങ്കിലും ടെസ്റ്റ് ബാൻഡുകളുടെ (പാൻ, പിഎഫ്) അഭാവം നെഗറ്റീവ് ഫലം സൂചിപ്പിക്കുന്നു.ടെസ്റ്റിൽ ഒരു ഇന്റേണൽ കൺട്രോൾ (C ബാൻഡ്) അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അത് ആട് ആന്റി മൗസ് IgG / mouse IgG (pHRP-II, pLDH-ഗോൾഡ് കൺജഗേറ്റുകൾ) എന്ന ഇമ്മ്യൂണോ കോംപ്ലക്സിന്റെ ബർഗണ്ടി നിറമുള്ള ബാൻഡ് പ്രദർശിപ്പിക്കണം. .അല്ലെങ്കിൽ, പരിശോധനാ ഫലം അസാധുവാണ് കൂടാതെ മറ്റൊരു ഉപകരണം ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിൾ വീണ്ടും പരിശോധിക്കേണ്ടതാണ്.